PCR / qPCR 反应体系构建自动化方案
将模板、引物、酶混合液和缓冲液的重复分配转换为可复用的自动化步骤,减少高频手工移液对体系一致性的影响。
内容目录
| 01 方案概览 | 02 典型流程 | 03 核心价值 | 04 适用场景 | 05 配置建议 |
一、方案概览
PCR 是分子生物学实验室中应用广泛的基础流程。随着样本和反应板数量增加,模板分配、引物体系添加和反应液混匀会消耗大量重复操作时间,并对移液准确性和防交叉污染管理提出要求。
Opentrons Flex PCR 工作站可围绕终点 PCR、qPCR 和扩增前体系构建进行配置。通过预设板位、体积分配和混匀方式,可将反应体系配置与热循环前后的转移步骤组织为连续流程。

二、典型自动化流程
以下流程用于说明典型 PCR 自动化组织方式,实际试剂体积、扩增程序和质控标准应遵循所用试剂盒及实验室 SOP。
| 01 | 样本与试剂准备 | 完成模板、引物、酶混合液、反应缓冲液与阴阳性对照的板位规划。 |
| 02 | 反应体系分配 | 按设定体积向 PCR 板分配反应液、模板和引物,降低重复加液差异。 |
| 03 | 混匀与封板 | 执行指定的混匀参数,并完成反应板封膜或封板前准备。 |
| 04 | 热循环衔接 | 可衔接甲板热循环模块或外置热循环仪,完成扩增程序前后的转移。 |
| 05 | 结果处理与归档 | 结合实验室检测结果保留批次、板位和方法参数记录。 |
三、核心价值
| 高频重复步骤自动化 将体系配置和多孔板分液等耗时步骤组织为稳定流程。 | 适配 PCR 与 qPCR 可按模板数量、引物组合和反应体积调整方法。 |
| 热循环流程衔接 可与甲板热循环模块或外置设备形成完整的扩增前处理流程。 | 降低人工操作差异 通过固定的体积、速度和板位逻辑提升批间一致性。 |

四、适用场景与方法边界
适用于终点 PCR、qPCR、基因分型、病原检测前处理、扩增体系筛选和常规分子实验室的多样本体系构建。
| 终点 PCR | 适用于常规扩增体系的模板、引物和酶混合液自动化分配。 |
| qPCR 体系构建 | 适用于多样本、多引物或多重复孔的反应板配置。 |
| 筛选与优化 | 可用于引物浓度、模板梯度或反应条件的板式组合设计。 |
| 扩增前处理 | 可与样本分装、核酸纯化或文库制备前处理相衔接。 |
为避免交叉污染,应根据实验室分区、耗材策略、阴阳性对照和封板流程完成风险评估与方法验证。
五、配置与资料说明
| 核心平台 | Opentrons Flex PCR 工作站。 |
| 可选热循环 | 可搭配甲板热循环模块,或与外置热循环仪进行流程衔接。 |
| 耗材策略 | 根据反应体积选择适配吸头、PCR 板和试剂槽。 |
| 附件资料 | 自动化 PCR 技术资料与第二代热循环仪说明资料。 |
可参考资料
自动化 PCR 技术资料
第二代热循环仪说明资料
PCR/qPCR 自动化方法沟通资料
方案咨询
可根据反应体系、板型、样本数量和热循环设备确认具体的工作站配置与验证安排。
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