NGS 文库制备自动化方案
将建库流程中的重复移液、磁珠纯化和板间转移组织为可参数化的自动化步骤,适配从方法建立到批量样本处理的工作节奏。
内容目录
| 01 方案概览 | 02 典型流程 | 03 核心价值 | 04 适用场景 | 05 配置建议 |
一、方案概览
NGS 文库制备通常包含样本分装、试剂分配、反应体系构建、磁珠纯化、片段筛选、PCR 扩增和文库汇总等多个环节。样本数量增加时,重复移液和多次板间转移容易拉长操作时间,也会增加批间差异的控制难度。
Opentrons Flex NGS 工作站以自动化移液平台为核心,可按照不同试剂盒和实验室 SOP 对加液顺序、混匀方式、磁珠处理和板位规划进行参数化设置。对常用试剂盒,可在验证后固化为可复用流程;对探索性方法,也可保留调整空间。

二、典型自动化流程
以下为常见 NGS 文库制备的流程组织方式,具体反应条件和步骤应以所用试剂盒说明书及实验室验证结果为准。
| 01 | 样本与板位规划 | 完成样本信息、试剂槽、耗材和反应板位的配置,建立可追溯的处理批次。 |
| 02 | 试剂分配与反应构建 | 按设定体积加入模板、酶混合液、接头或缓冲液,并通过受控混匀降低手工操作差异。 |
| 03 | 磁珠纯化与片段筛选 | 执行磁珠结合、磁吸、洗涤和洗脱,按方法需要加入双侧或单侧片段筛选步骤。 |
| 04 | PCR 扩增与文库整理 | 完成扩增体系分配、反应板转移和扩增后清理,为后续质控与上机前归一化做准备。 |
| 05 | 质控与上机前准备 | 结合实验室质控结果完成文库汇总、定量和最终转移。 |
三、核心价值
| 端到端流程组织 覆盖建库前处理中的关键液体处理步骤,减少重复手动移液。 | 适配多类试剂盒 可按 Illumina、IDT、Qiagen 等试剂盒与实验室 SOP 进行方法配置。 |
| 兼顾通量与灵活性 可从小批量方法建立扩展至多样本并行处理。 | 可追溯操作记录 按流程保留板位、参数和运行记录,便于批次复核。 |

四、适用场景与方法边界
该方案可用于 DNA、RNA、全基因组、靶向、微生物、miRNA 和单细胞相关文库制备场景的自动化前处理。
| 全基因组与靶向建库 | 适用于模板分装、酶切或片段化、接头连接、PCR 与纯化等连续步骤。 |
| RNA 与 miRNA 建库 | 可针对小体积加液、磁珠纯化和多板并行设计流程。 |
| 高通量批处理 | 适合需要提升批次一致性、减少人工重复操作的多样本项目。 |
| 方法开发与转移 | 可在验证阶段保留参数调整空间,确认后固化为标准流程。 |
不同试剂盒对温控、混匀、磁珠比例和反应时间的要求不同,正式运行前应完成方法适配与质量验证。
五、配置与资料说明
| 核心平台 | Opentrons Flex 自动化移液工作站。 |
| 可选模块 | 磁力架、温控、热循环、抓手和耗材堆栈按流程配置。 |
| 典型通量 | 可支持多样本并行处理,实际通量取决于试剂盒、反应时长和质控要求。 |
| 附件资料 | 高通量 NGS 工作站宣传资料及相关应用笔记。 |
可参考资料
全自动化全基因组测序文库制备应用笔记
高通量 NGS 工作站宣传资料
PacBio、Twist、QIAseq 与单细胞 RNA 测序相关流程资料
方案咨询
可根据样本类型、试剂盒和目标通量确认板位布局、模块配置和方法验证路径。
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